مطالعه تحمل به شوری در ریشه های تراریخته گیاه تنباکو (nicotiana tabacum l.)

در این تحقیق گیاه تنباکو (nicotiana tabacum l.) رقم wisconsin توسط باکتریagrobacterium rhizogenes حاوی پلاسمید pri15834-prt35s-gus به روش کشت همراه ترانسفرم گردید. ریشه های موئین تراریخته ایجاد شده توسط توانایی رشدشان بر روی محیط کشت حاوی کانامایسین مشخص شدند. برای تائید ترانسفرم بودن ریشه ها از سوبسترای x-gluc و همچنین pcr استفاده شد. آبی رنگ شدن ریشه ها در تست gus تائیدی بر انجام موفق ترانسفورماسیون بود. سپس برای رشد و تکثیر ریشه ها از محیط کشت ms جامد استفاده شد. از این ریشه های تراریخته ابتدا کالوس و سپس گیاهان تراریخته باززائی گردید و پس از آن میزان اکسین در قسمت ساقه و ریشه این گیاهان اندازه گیری شد. نتایج بدست آمده نشان داد مقدار اکسین در گیاهان تراریخته نسبت به گیاه شاهد افزایش قابل توجهی داشته است که با ریشه زایی بیشتر و ایجاد hairy root گیاه تراریخته مطابقت داشت. افزایش میزان اکسین باعث افزایش ریشه زایی گردید اما از رشد و طویل شدن ریشه ها تا حدودی جلوگیری نمود. سپس جهت بررسی مقاومت به شوری گیاهان تراریخته و گیاهان شاهد به محیط مایع حاوی 300 میلی مولار نمک nacl منتقل شدند. بعد از 4 هفته از محیط نمکی خارج شده و مورد آنالیز قرار گرفتند، وزن تر، وزن خشک، میزان کلروفیل نسبی، و میزان سدیم و پتاسیم در ریشه و ساقه آنها اندازه گیری شد. وزن تر و وزن خشک ریشه های تراریخته نسبت به ریشه های شاهد افزایش داشت، همچنین وزن تر و وزن خشک ساقه و برگ گیاهان تراریخته تحت تیمار نمکی افزایش قابل توجهی نسبت به شاهد نشان داد. در گیاهان تحت تنش شوری میزان سدیم ریشه های شاهد و تراریخته افزایش یافت و باعث افزایش رشد ریشه های تراریخته شد. مقدار سدیم در ساقه و برگ گیاهان تحت تنش شوری افزایش یافت و این افزایش در گیاهان تراریخته بیشتر بود،میزان پتاسیم در ریشه های تراریخته افزایش داشت، ولی میزان پتاسیم در ساقه و برگ گیاهان تراریخته افزایش قابل ملاحظه ای نداشت. میزان کلروفیل نسبی هم در گیاهان شاهد و هم در گیاهان تراریخته تحت تیمار نمکی کاهش معنی داری نسبت به گیاهان در محیط فاقد نمک نشان داد. میزان ریشه زایی گیاهان تحت تنش نمک نیز بررسی شد و مشخص گردید ri پلاسمید باعث افزایش توان ریشه زایی گیاه تحت تنش نمک می شود.